Generación de variantes somaclonales de olivo resistentes a Verticilosis

En este proyecto se pretende abordar, por primera vez, la obtención de material de olivo resistente a Verticilosis mediante selección de células embriogénicas resistentes al filtrado del hongo y posterior regeneración de plantas a partir del material seleccionado. Este objetivo global se abordará desde aproximaciones distintas, pero complementarias. La primera estrategia se basa en la exposición de células de olivo a altas concentraciones de filtrado (40-60%), con objeto de inducir variaciones genéticas en base al estrés causado en las células por la presencia del agente selectivo, tal y como se ha observado en otros casos. Como complemento a esta estrategia, los cultivos embriogénicos se tratarán con un mutágeno químico con objeto de incrementar la variabilidad y, posteriormente, se expondrá la nueva población celular a altas concentraciones de filtrado del hongo, como paso previo a la regeneración de plantas. En una segunda estrategia, las células embriogénicas se cultivarán en presencia de dosis bajas de filtrado del patógeno (10-20%), con objeto de forzar la formación de nuevos embriones somáticos en presencia del agente inductor del estrés y, de esa manera, inducir cambios epigenéticos que sean transmisibles a la descendencia. Posteriormente, se llevará a cabo la regeneración de plantas a partir de estos embriones somáticos. Asimismo, se llevará a cabo un análisis transcriptómico de la respuesta inducida tras la exposición al patógeno de plantas tolerantes al filtrado y controles y también se evaluará el efecto de tratamientos con filtrado crudo como elicitor, en la inducción de respuestas de defensa frente al patógeno.