Unidad de Transformación Genética y Cultivo in Vitro de Plantas

El cultivo de tejidos vegetales in vitro consiste en el cultivo de células, tejidos u órganos vegetales bajo condiciones asépticas, en medios de cultivo artificiales y condiciones ambientales controladas. Las técnicas de cultivo de tejidos como la micropropagación, regeneración adventicia o embriogénesis somática, se han convertido en herramientas biotecnológicas esenciales para la manipulación genética y la clonación de plantas.
El objetivo principal de la Unidad de Transformación Genética y Cultivo in Vitro del IHSM es proporcionar apoyo a los grupos de investigación del Instituto en la aplicación de estas técnicas en los cultivos de interés agrícola y especies modelo objeto de sus investigaciones. Asimismo, el servicio se ofrece a empresas del sector agrícola que pudieran estar interesadas.

Servicios


Además de la gestión del equipamiento y los espacios comunes necesarios para la ejecución de técnicas de cultivo in vitro de plantas, la Unidad ofrece los siguientes servicios:

  1. Transformación mediada por Agrobacterium tumefaciens de:
    1. Fresa (Fragaria x ananassa)
    2. Nicotiana benthamiana
    3. Solanum lycopersicum
    4. Prunus domestica
  2. Técnicas de cultivo in vitro de fresa, olivo y Prunus:
    1. Establecimiento in vitro
    2. Multiplicación in vitro
    3. Mantenimiento in vitro
  3. Asesoramiento en la puesta a punto de protocolos de:
    1. Transformación
    2. Regeneración
    3. Edición genética

Para solicitar los servicios ofertados por la Unidad, deberá descargar el formulario desde el siguiente enlace (formulario_invitro.docm) y rellenarlo siguiendo las instrucciones detalladas en el mismo. A continuación envíelo a la dirección de correo (invitro@ihsm.uma-csic.es). Nos pondremos en contacto a la mayor brevedad posible.

IHSM La Mayora

Cabinas de flujo laminar horizontal


La sala está situada en la planta baja (sala C04).
Cuenta con cuatro cabinas de flujo laminar horizontal modelo LHG-6BG-F8 (ESCO). Estas cabinas permiten trabajar en condiciones de esterilidad y ausencia de partículas, mediante un barrido de aire impulsado en régimen laminar sobre la zona de trabajo a una velocidad de 0,45 m/s (regulable) a través de un filtro HEPA H14 con eficacia de retención del 99.999 %. Cada cabina cuenta con un esterilizador de bolas de vidrio (Steri 350) para esterilizar el instrumental.
Para acceder al sistema de reservas de las cabinas, los usuarios deben ponerse en contacto con los responsables del servicio a través de la dirección de correo electrónico (invitro@ihsm.uma-csic.es)

IHSM La Mayora

Cámaras de cultivo in vitro


IHSM La Mayora

El centro cuenta con tres cámaras tipo fitotrón visitables Hederahelix situadas en la planta baja (salas C001, C002 y C003).
Cada cámara, con una superficie de 12 m2, consta de tres módulos de estanterías: un módulo central y dos en cada una de las paredes laterales. Dos de las cámaras (C001 y C002) están equipadas con luminarias tipo fluorescente Sylvania Gro-Lux T8 y la otra cámara (C003) dispone de iluminación LED. Las condiciones ambientales de las cámaras son: 25°C de temperatura y fotoperiodo de 16 horas luz, siendo la irradiancia regulable en cada estante desde 30 a 60 µmol m-2 s-1. Están disponibles también varios estantes en oscuridad.
Los usuarios pueden reservar las baldas que necesiten a través de la aplicación de reservas del Instituto. (https://www.ihsm.uma-csic.es/reservas) Espacios / Cámaras Cultivo In Vitro / Teatinos Cámaras de Cultivo In Vitro Planta Baja

Laboratorio de la Unidad


Se localiza en la sala C011 de la planta baja.
Cuenta con tres cabinas de flujo laminar horizontal, dos fitotrones para el mantenimiento de plantas in vitro (ciclo día corto), un equipo biobalistic (BioRad) y una zona de preparación de medios de cultivo.
Asimismo, en la sala C012 se dispone de equipos generales de laboratorio como máquina de hielo, un sistema de producción de agua destilada y otro de agua ultrapura, tres autoclaves, lavavajillas, etc.

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Normas de utilización del equipamiento

Cabinas de flujo laminar horizontal:

Para trabajar en las cabinas de flujo laminar horizontal, tanto del laboratorio de cultivo in vitro como de la sala de cabinas, será necesario leer y cumplir las normas de uso y reservar el puesto mediante el sistema de reservas interno.

NORMAS PARA TRABAJAR ADECUADAMENTE EN LA CABINA DE FLUJO:

  1. Hacer uso de la bata de laboratorio.
  2. Limpiar con papel de rollo y etanol al 70% la superficie de trabajo de la cabina y los laterales, no el filtro, antes y después de haber trabajado en ella.
  3. Mantener el orden y limpieza mientras se esté trabajando en la cabina.
  4. No está permitido el uso de mechero en el interior.
  5. No está permitido dejarse nada en el interior una vez se haya finalizado el trabajo.
  6. Si se ha trabajado con Agrobacterium activar la lámpara UV una vez finalizado el trabajo.
  7. No trabajar en las cabinas de flujo si se ha visitado y/o estado trabajando en la sala de preparación de sustrato, cámaras de plantas del sótano o invernadero.
RECOMENDACIONES:

  1. Es aconsejable recogerse el pelo, evitar realizar movimientos bruscos en el interior y obstaculizar el flujo de aire para reducir la posibilidad de que se produzcan contaminaciones.
  2. Se recomienda trabajar en la parte central de la superficie, evitando trabajar muy cerca del borde y del filtro para evitar que pueda verse afectado por algún vertido.
  3. El material introducido en el interior de la cabina debe haber sido esterilizado previa y adecuadamente, evitando así posibles contaminaciones.

Cámaras de cultivo in vitro:

Las cámaras C001, C002 (luz tipo fluorescente) y C003 (luz tipo LED) están disponibles para la reserva de baldas por parte de los usuarios. Para ello será necesario estar informado y cumplir con las normas de uso, así como reservar las baldas previamente a través del sistema interno de reservas.

NORMAS DE USO DE LAS CÁMARAS DE CULTIVO IN VITRO DE PLANTAS:

  1. Las cámaras son para uso exclusivo de material vegetal cultivado en condiciones in vitro. No se permite el cultivo de plantas en maceta o fuera de un recipiente estéril.
  2. La reserva de espacio se realizará mediante la Aplicación de Gestión de Reservas del IHSM (https://www.ihsm.uma-csic.es/reservas) / Espacios / Cámaras Cultivo In Vitro / Teatinos Cámaras de Cultivo In Vitro Planta Baja). En caso de ser necesario modificar dichas reservas los usuarios deberán contactar con los responsables del área mediante correo electrónico (invitro@ihsm.uma-csic.es). No se permite el uso de estantes sin reserva previa.
  3. El usuario será el responsable de mantener el espacio reservado en condiciones higiénicas adecuadas.
  4. Los cultivos deberán mantenerse en condiciones sanitarias adecuadas. El material contaminado y los cultivos antiguos que no se vayan a subcultivar deben ser retirados y autoclavados de manera inmediata.
  5. El material de la cámara se revisará semanalmente por el técnico responsable del servicio de cultivo in vitro. En caso de encontrar material contaminado y/o cultivos antiguos en malas condiciones, se comunicará vía email al usuario y al investigador responsable, para que estos cultivos sean eliminados lo antes posible. Si no hubiera respuesta del usuario/investigador y el material no fuera retirado en el plazo de una semana, el técnico responsable se encargará de hacerlo.
  6. El uso de cualquier microorganismo debe ser previamente consultado con los responsables del área para su evaluación y autorización. En caso de no autorizarse su uso los responsables del área orientarán a los usuarios acerca de los espacios más adecuados para realizar sus experimentos.
  7. Se mantendrán las puertas de las cámaras siempre cerradas.
  8. Es obligatorio el uso de bata en el interior de las cámaras.
  9. No está permitido el acceso a las cámaras de cultivo in vitro si antes se ha visitado el invernadero o las cámaras de cultivo del sótano.
  10. El nivel de irradiancia, a escoger por el usuario, se regula mediante el encendido/apagado de cada fluorescente del estante de manera independiente. Las luminarias no pueden modificarse.

Dirección y contacto:

La sala de cabinas de flujo laminar horizontal, las cámaras de cultivo in vitro, así como el laboratorio la Unidad de Transformación Genética y Cultivo in vitro de plantas se encuentran en la planta baja del edificio del IHSM en el campus de Teatinos de la Universidad de Málaga.

IHSM Teatinos
Av. Louis Pasteur, 49.
29010 MÁLAGA
952134192
Email: invitro@ihsm.uma-csic.es

Personal:

Responsables:
José Ángel Mercado Carmona (mercado@uma.es)
César Petri Serrano (cesar.petri@csic.es)

Técnicos:
Isabel Narváez Jurado (narvaez@uma.es)
Francisco M. Conde Pérez (franciscom.conde@csic.es)

Técnico auxiliar:
Manuel Arroyo (marroyo@ihsm.uma-csic.es)

Tarifas:

  • Sala de cabinas de flujo laminar horizontal
    Reserva de puesto para personal del IHSM: sin coste

  • Cámaras de cultivo in vitro
    Reserva diaria de 1 balda en cámara de in vitro de plantas:
    • IHSM-UMA: 0,10€
    • OPI: 0,15€
    • Privado: 0,2€

  • Unidad de Transformación Genética y Cultivo in vitro de Plantas
    Consultar las tarifas de los servicios ofertados en la dirección de correo (invitro@ihsm.uma-csic.es)

Reservas:

  • Sala de cabinas de flujo laminar horizontal:
    Se tiene que solicitar a través del correo electrónico invitro@ihsm.uma-csic.es y se recibirá un correo con las instrucciones a seguir.

  • Cámaras de cultivo in vitro:
    La reserva de espacio se realizará mediante la Aplicación de Gestión de Reservas del IHSM (https://www.ihsm.uma-csic.es/reservas) Espacios / Cámaras Cultivo In Vitro / Teatinos Cámaras de Cultivo In Vitro Planta Baja