Estrategias de control biológico eficientes contra Rosellinia necatrix: de la genómica funcional al campo

Este proyecto coordinado persigue avanzar en las diferentes estrategias desarrolladas para un control biológico eficaz de la podredumbre blanca radicular del aguacate, causada por el hongo Rosellinia necatrix. Para ello, se aplicarán los conocimientos adquiridos hasta el momento sobre los distintos componentes que interaccionan en este sistema con el objetivo de abordar el control de esta enfermedad de forma eficaz. Aislados hipovirulentos de R. necatrix y afines pueden ser portadores de segmentos de dsRNA y ser capaces de transmitir hipovirulencia a aislados patogénicos. Se ha detectado una baja presencia de aislados no patogénicos de R. necatrix en prospecciones de campo, sin embargo, si se ha observado una mayor incidencia de nuevos hongos identificados como Entoleuca sp, un género cercano a Rosellinia, y que infestan suelos de árboles escape de aguacate. Algunas cepas de este género no son patógenas de aguacate y proporcionan una acción de biocontrol de la podredumbre blanca. Por tanto este género fúngico va a ser objeto de estudio para discernir el papel de los micovirus de Entoleuca sp. en el control biológico de esta enfermedad, a la vez que se van a desarrollar aplicaciones en campo de formulados comerciales del hongo antagonista Trichoderma, del que se dispone de cepas con potencial actividad de biocontrol de la enfermedad. Por otro lado, y empleando como modelo la bacteria de biocontrol Pseudomonas chlororaphis PCL1606, se pretende profundizar en el estudio de las interacciones que tienen lugar durante el biocontrol. Así, se emplearán distintas técnicas que abarcan desde la genómica funcional a la biología celular para estudiar la regulación por “quorum sensing” y su papel en el biocontrol de R. necatrix, así como en la biología de la bacteria. Además se realizarán las primeras aproximaciones al empleo de P. chlororaphis PCL1606 como agente de biocontrol de forma comercial. Para ello, se formulará esta cepa y se aplicará en forma de producto formulado mediante ensayos de microcosmos sobre plantas de aguacate, y se valorarán aspectos como la protección contra R. necatrix, el efecto de su aplicación sobre la microbiota del suelo o la movilidad de la bacteria en el sistema experimental. Dependiendo de los resultados obtenidos, incluso se podrían programar los primeros ensayos de aplicación de P. chlororaphis en fincas comerciales. Finalmente, se pretende abordar la regeneración de plantas de aguacate vía embriogénesis somática, a partir de explantos adultos (ápices caulinares y cubiertas de la semilla), para poder llevar a cabo la manipulación de material con buenas caracteristicas agronómicas, y evaluar si se produce una recuperación de la capacidad morfogenética, que facilite la multiplicación in vitro de brotes de origen adulto. paralelamente, se abordará la obtención de plantas tetraploides, a partir de cultivos de embriogénicos seleccionados en el proyecto vigente, asi como de cultivos resistentes al filtrado de R. necatrix, con objeto de evaluar si las plantas con mayor nivel de ploidía muestran menor porte y mayor plasticidad ante una situación de estrés. Asimismo se va a continuar con la optimización del protocolo de frigoconservación que nos permita conservar in vitro los cultivos embriogénicos. Finalmente, se va a evaluar el comportamiento frente a R. necatrix de material transformado con el gen AtNPR1, en presencia de microorganismos antagonistas seleccionados por los equipos del Subp. 1-MICRO y Subp.2-IAS.