"Protocol: an improved method to quantify activation of systemic acquired resistance (SAR)"

Artículo de José S. Rufián, Javier Rueda-Blanco, Carmen R. Beuzón and Javier Ruiz-Albert, publicado en Plant Methods. Las plantas activan varios niveles de defensa cuando detectan la presencia de un patógeno invasor. Parte de estas respuestas incluyen la generación de una serie de señales móviles que pueden desplazarse a través de diferentes tejidos para alertar a partes distales de la planta de una posible invasión y de la necesidad de incrementar sus niveles de defensa en tejidos que aún no la han sufrido. Esto genera una respuesta que se conoce como resistencia sistémica adquirida o SAR (por sus siglas en inglés, Systemic Acquired Resistance). El método más directo para determinar la activación e intensidad de esta respuesta de defensa consiste en inocular el patógeno en un punto de la planta y, pasado un tiempo, realizar un ensayo de multiplicación del patógeno en hojas distales. Aunque este tipo de ensayo es el único que proporciona información directa de la relevancia biológica de la defensa tipo SAR, siempre ha estado limitado por su gran variación experimental, que obliga a realizar un elevado número de repeticiones. Muchas de las fuentes de variación experimental asociadas al ensayo estándar de SAR en el patosistema Arabidopsis-Pseudomonas syringae, incluyendo los genotipos de planta y patógeno, condiciones ambientales, o procedimientos de inoculación, ya han sido optimizadas en protocolos previos, mejorando la reproducibilidad. En este trabajo presentamos una nueva modificación metodológica, ensayada en nuestro laboratorio, que tiene en consideración las relaciones fuente-sumidero (ortostiquias) existentes entre las diferentes hojas de la planta, y que implica una mayor competencia de determinadas hojas superiores para recibir señales móviles de activación de SAR procedentes de hojas inferiores infectadas. Demostramos que la selección estricta de hojas sistémicas en las que realizar el ensayo de multiplicación, escogiendo solo aquellas que reciben más eficientemente la señal de activación de SAR, mejora significativamente la reproducibilidad de los ensayos, disminuyendo muy notablemente el número de repeticiones necesarias para obtener resultados significativos.

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